Liquid chromatography ເປັນວິທີການຕົ້ນຕໍໃນການທົດສອບເນື້ອໃນຂອງແຕ່ລະອົງປະກອບແລະ impurities ໃນວັດຖຸດິບ, intermediates, ການກະກຽມແລະອຸປະກອນການຫຸ້ມຫໍ່, ແຕ່ສານຈໍານວນຫຼາຍບໍ່ມີວິທີການມາດຕະຖານທີ່ຈະອີງໃສ່, ສະນັ້ນມັນເປັນໄປບໍ່ໄດ້ທີ່ຈະພັດທະນາວິທີການໃຫມ່. ໃນການພັດທະນາວິທີການໄລຍະຂອງແຫຼວ, ຖັນ chromatographic ເປັນຫຼັກຂອງ chromatography ຂອງແຫຼວ, ສະນັ້ນວິທີການເລືອກຖັນ chromatographic ທີ່ເຫມາະສົມແມ່ນສໍາຄັນ. ໃນບົດຄວາມນີ້, ຜູ້ຂຽນຈະອະທິບາຍວິທີການເລືອກຄໍລໍາ chromatography ແຫຼວຈາກສາມດ້ານ: ແນວຄວາມຄິດໂດຍລວມ, ການພິຈາລະນາແລະຂອບເຂດການນໍາໃຊ້.
A. ແນວຄວາມຄິດໂດຍລວມສໍາລັບການເລືອກຖັນ chromatography ແຫຼວ
1. ປະເມີນຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບ ແລະ ເຄມີຂອງເຄື່ອງວິເຄາະ: ເຊັ່ນ: ໂຄງສ້າງທາງເຄມີ, ການລະລາຍ, ຄວາມໝັ້ນຄົງ (ເຊັ່ນ: ມັນງ່າຍທີ່ຈະຖືກ oxidized / ຫຼຸດລົງ / hydrolyzed), ອາຊິດແລະເປັນດ່າງ, ແລະອື່ນໆ, ໂດຍສະເພາະໂຄງສ້າງທາງເຄມີແມ່ນສໍາຄັນ. ປັດໄຈໃນການກໍານົດຄຸນສົມບັດ, ເຊັ່ນ: ກຸ່ມ conjugated ມີການດູດຊຶມ ultraviolet ທີ່ເຂັ້ມແຂງແລະ fluorescence ທີ່ເຂັ້ມແຂງ;
2. ກໍານົດຈຸດປະສົງຂອງການວິເຄາະ: ບໍ່ວ່າຈະເປັນການແຍກສູງ, ປະສິດທິພາບຖັນສູງ, ເວລາການວິເຄາະສັ້ນ, ຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ, ຄວາມຕ້ານທານຄວາມກົດດັນສູງ, ຊີວິດຖັນຍາວ, ຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຕ່ໍາ, ແລະອື່ນໆແມ່ນຕ້ອງການ;
- ເລືອກຖັນ chromatographic ທີ່ເຫມາະສົມ: ເຂົ້າໃຈອົງປະກອບ, ຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບແລະທາງເຄມີຂອງ filler chromatographic, ເຊັ່ນ: ຂະຫນາດອະນຸພາກ, ຂະຫນາດ pore, ຄວາມທົນທານຕໍ່ອຸນຫະພູມ, ຄວາມທົນທານຕໍ່ pH, ການດູດຊຶມຂອງການວິເຄາະ, ແລະອື່ນໆ.
- ການພິຈາລະນາເລືອກຖັນ chromatography ຂອງແຫຼວ
ໃນບົດນີ້ຈະປຶກສາຫາລືກ່ຽວກັບປັດໃຈທີ່ຈະພິຈາລະນາໃນເວລາທີ່ເລືອກຖັນ chromatography ຈາກທັດສະນະຂອງຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບແລະທາງເຄມີຂອງຖັນ chromatography ຕົວຂອງມັນເອງ. 2.1 ຟິວເລີເມທຣິກ
2.1.1 Silica gel matrix ຕາຕະລາງ filler ຂອງຖັນ chromatography ຂອງແຫຼວສ່ວນຫຼາຍແມ່ນ silica gel. ປະເພດຂອງເຄື່ອງຕື່ມນີ້ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງ, ຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຕ່ໍາ, ຄວາມເຂັ້ມແຂງກົນຈັກສູງ, ແລະງ່າຍທີ່ຈະດັດແປງກຸ່ມ (ເຊັ່ນ: ການຜູກມັດ phenyl, ການຜູກມັດ amino, ການຜູກມັດ cyano, ແລະອື່ນໆ), ແຕ່ຄ່າ pH ແລະລະດັບອຸນຫະພູມທີ່ມັນທົນທານຕໍ່ແມ່ນຈໍາກັດ: ລະດັບ pH ຂອງ silica gel fillers matrix ສ່ວນຫຼາຍແມ່ນ 2 ຫາ 8, ແຕ່ລະດັບ pH ຂອງໄລຍະການຜູກມັດຊິລິກາເຈນທີ່ຖືກດັດແປງພິເສດສາມາດກວ້າງເຖິງ 1.5 ຫາ 10, ແລະຍັງມີໄລຍະການຜູກມັດຊິລິກາເຈນທີ່ຖືກດັດແປງພິເສດທີ່ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງຢູ່ທີ່ pH ຕ່ໍາ, ເຊັ່ນ Agilent ZORBAX RRHD stabilitybond-C18, ເຊິ່ງມີຄວາມຫມັ້ນຄົງຢູ່ທີ່ pH 1 ຫາ 8; ຂອບເຂດຈໍາກັດອຸນຫະພູມເທິງຂອງ silica gel matrix ປົກກະຕິແລ້ວແມ່ນ 60 ℃, ແລະບາງຖັນ chromatography ສາມາດທົນທານຕໍ່ອຸນຫະພູມຂອງ 40 ℃ pH ສູງ.
2.1.2 Polymer matrix ຕົວຕື່ມ Polymer ສ່ວນຫຼາຍແມ່ນ polystyrene-divinylbenzene ຫຼື polymethacrylate. ຂໍ້ດີຂອງພວກມັນແມ່ນວ່າພວກເຂົາສາມາດທົນທານຕໍ່ລະດັບ pH ກວ້າງ - ພວກມັນສາມາດນໍາໃຊ້ໄດ້ໃນລະດັບ 1 ຫາ 14, ແລະພວກມັນທົນທານຕໍ່ອຸນຫະພູມສູງ (ສາມາດບັນລຸສູງກວ່າ 80 ° C). ເມື່ອປຽບທຽບກັບສານເຕີມເຕັມ C18 ທີ່ມີຊິລິກາ, ປະເພດຂອງສານເຕີມເຕັມນີ້ມີນ້ໍາທີ່ເຂັ້ມແຂງກວ່າ, ແລະໂພລີເມີເມໂຄຣອັສມີປະສິດຕິຜົນຫຼາຍໃນການແຍກຕົວຢ່າງເຊັ່ນທາດໂປຼຕີນ. ຂໍ້ເສຍຂອງມັນແມ່ນວ່າປະສິດທິພາບຂອງຖັນແມ່ນຕ່ໍາແລະຄວາມເຂັ້ມແຂງກົນຈັກແມ່ນອ່ອນເພຍກ່ວາຂອງ fillers silica. 2.2 ຮູບຮ່າງຂອງອະນຸພາກ
ເຄື່ອງເຕີມ HPLC ທີ່ທັນສະໄຫມສ່ວນຫຼາຍແມ່ນອະນຸພາກ spherical, ແຕ່ບາງຄັ້ງມັນເປັນອະນຸພາກສະຫມໍ່າສະເຫມີ. ອະນຸພາກ spherical ສາມາດສະຫນອງຄວາມກົດດັນຂອງຖັນຕ່ໍາ, ປະສິດທິພາບຖັນສູງຂຶ້ນ, ຄວາມຫມັ້ນຄົງແລະຊີວິດຍາວ; ໃນເວລາທີ່ການນໍາໃຊ້ໄລຍະມືຖືທີ່ມີຄວາມຫນືດສູງ (ເຊັ່ນ: ອາຊິດ phosphoric) ຫຼືໃນເວລາທີ່ການແກ້ໄຂຕົວຢ່າງແມ່ນ viscous, particles ສະຫມໍ່າສະເຫມີມີພື້ນທີ່ສະເພາະຂະຫນາດໃຫຍ່, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ການດໍາເນີນການຢ່າງເຕັມທີ່ຂອງທັງສອງໄລຍະ, ແລະລາຄາແມ່ນຂ້ອນຂ້າງຕ່ໍາ. 2.3 ຂະໜາດອະນຸພາກ
ຂະຫນາດຂອງອະນຸພາກຂະຫນາດນ້ອຍກວ່າ, ປະສິດທິພາບຂອງຖັນສູງຂຶ້ນແລະການແຍກຕົວສູງຂຶ້ນ, ແຕ່ຄວາມຕ້ານທານຄວາມກົດດັນສູງກໍ່ຮ້າຍແຮງຂຶ້ນ. ຖັນທີ່ໃຊ້ຫຼາຍທີ່ສຸດແມ່ນຖັນຂະຫນາດອະນຸພາກ 5 μm; ຖ້າຄວາມຕ້ອງການການແຍກແມ່ນສູງ, ສາມາດເລືອກ filler 1.5-3 μm, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ການແກ້ໄຂບັນຫາການແຍກຕົວຂອງບາງຕົວແບບສະລັບສັບຊ້ອນແລະຫຼາຍອົງປະກອບ. UPLC ສາມາດນໍາໃຊ້ 1.5 μm fillers; 10 μmຫຼືຕົວຕື່ມຂະຫນາດອະນຸພາກຂະຫນາດໃຫຍ່ມັກຈະຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບຖັນເຄິ່ງກະກຽມຫຼືການກະກຽມ. 2.4 ປະລິມານຄາບອນ
ເນື້ອໃນຄາບອນຫມາຍເຖິງອັດຕາສ່ວນຂອງໄລຍະຜູກມັດຢູ່ດ້ານຂອງ silica gel, ເຊິ່ງກ່ຽວຂ້ອງກັບພື້ນທີ່ສະເພາະແລະການປົກຫຸ້ມຂອງໄລຍະຜູກມັດ. ເນື້ອໃນຂອງຄາບອນສູງສະຫນອງຄວາມອາດສາມາດຂອງຖັນສູງແລະຄວາມລະອຽດສູງ, ແລະມັກຈະຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບຕົວຢ່າງທີ່ສະລັບສັບຊ້ອນທີ່ຕ້ອງການການແຍກສູງ, ແຕ່ເນື່ອງຈາກການຕິດຕໍ່ພົວພັນຍາວລະຫວ່າງສອງໄລຍະ, ເວລາການວິເຄາະແມ່ນຍາວ; ຖັນ chromatographic ເນື້ອໃນຄາບອນຕ່ໍາມີເວລາການວິເຄາະສັ້ນກວ່າແລະສາມາດສະແດງໃຫ້ເຫັນການຄັດເລືອກທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ແລະມັກຈະຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບຕົວຢ່າງງ່າຍດາຍທີ່ຕ້ອງການການວິເຄາະຢ່າງໄວວາແລະຕົວຢ່າງທີ່ຕ້ອງການເງື່ອນໄຂໄລຍະທີ່ມີນ້ໍາສູງ. ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ປະລິມານຄາບອນຂອງ C18 ແມ່ນຕັ້ງແຕ່ 7% ຫາ 19%. 2.5 ຂະໜາດຂອງຮູຂຸມຂົນ ແລະພື້ນທີ່ສະເພາະ
ສື່ການດູດຊຶມ HPLC ແມ່ນອະນຸພາກທີ່ມີຮູຂຸມຂົນ, ແລະປະຕິສໍາພັນສ່ວນໃຫຍ່ເກີດຂຶ້ນຢູ່ໃນຮູຂຸມຂົນ. ດັ່ງນັ້ນ, ໂມເລກຸນຕ້ອງເຂົ້າໄປໃນຮູຂຸມຂົນເພື່ອດູດຊຶມແລະແຍກອອກ.
ຂະຫນາດ pore ແລະພື້ນທີ່ສະເພາະແມ່ນສອງແນວຄວາມຄິດທີ່ສົມບູນ. ຂະຫນາດ pore ຂະຫນາດນ້ອຍຫມາຍຄວາມວ່າພື້ນທີ່ສະເພາະຂະຫນາດໃຫຍ່, ແລະໃນທາງກັບກັນ. ພື້ນທີ່ສະເພາະຂະຫນາດໃຫຍ່ສາມາດເພີ່ມປະຕິສໍາພັນລະຫວ່າງໂມເລກຸນຕົວຢ່າງແລະໄລຍະການຜູກມັດ, ເສີມຂະຫຍາຍການເກັບຮັກສາ, ເພີ່ມທະວີການໂຫຼດຕົວຢ່າງແລະຄວາມອາດສາມາດຂອງຖັນ, ແລະການແຍກອົງປະກອບສະລັບສັບຊ້ອນ. fillers porous ຢ່າງເຕັມສ່ວນເປັນຂອງປະເພດຂອງ fillers ນີ້. ສໍາລັບຜູ້ທີ່ມີຄວາມຕ້ອງການແຍກສູງ, ແນະນໍາໃຫ້ເລືອກ fillers ທີ່ມີພື້ນທີ່ສະເພາະຂະຫນາດໃຫຍ່; ພື້ນທີ່ສະເພາະຂະຫນາດນ້ອຍສາມາດຫຼຸດຜ່ອນຄວາມກົດດັນກັບຄືນໄປບ່ອນ, ປັບປຸງປະສິດທິພາບຂອງຖັນ, ແລະຫຼຸດຜ່ອນເວລາສົມດຸນ, ທີ່ເຫມາະສົມສໍາລັບການວິເຄາະ gradient. ແກນ-shell fillers ເປັນຂອງປະເພດຂອງ fillers ນີ້. ບົນພື້ນຖານການຮັບປະກັນການແຍກ, ມັນແນະນໍາໃຫ້ເລືອກ fillers ທີ່ມີພື້ນທີ່ສະເພາະຂະຫນາດນ້ອຍສໍາລັບຜູ້ທີ່ມີຄວາມຕ້ອງການປະສິດທິພາບການວິເຄາະສູງ. 2.6 ປະລິມານຂອງຮູຂຸມຂົນແລະຄວາມເຂັ້ມແຂງກົນຈັກ
ປະລິມານຂອງຮູຂຸມຂົນ, ເຊິ່ງເອີ້ນກັນວ່າ "ປະລິມານຮູຂຸມຂົນ", ຫມາຍເຖິງຂະຫນາດຂອງປະລິມານທີ່ບໍ່ມີປະໂຫຍດຕໍ່ອະນຸພາກ. ມັນດີສາມາດສະທ້ອນເຖິງຄວາມເຂັ້ມແຂງກົນຈັກຂອງ filler ໄດ້. ຄວາມເຂັ້ມແຂງກົນຈັກຂອງ fillers ທີ່ມີປະລິມານ pore ຂະຫນາດໃຫຍ່ແມ່ນເລັກນ້ອຍຫນ້ອຍກ່ວາຂອງ fillers ທີ່ມີປະລິມານ pore ຂະຫນາດນ້ອຍ. Fillers ທີ່ມີປະລິມານ pore ຫນ້ອຍກວ່າຫຼືເທົ່າກັບ 1.5 mL / g ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ສໍາລັບການແຍກ HPLC, ໃນຂະນະທີ່ fillers ທີ່ມີປະລິມານ pore ຫຼາຍກ່ວາ 1.5 mL / g ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ສໍາລັບການຍົກເວັ້ນໂມເລກຸນ chromatography ແລະ chromatography ຄວາມກົດດັນຕ່ໍາ. 2.7 ອັດຕາກໍານົດ
Capping ສາມາດຫຼຸດຜ່ອນຈຸດສູງສຸດຂອງຫາງທີ່ເກີດຈາກປະຕິສໍາພັນລະຫວ່າງທາດປະສົມແລະກຸ່ມ silanol ທີ່ຖືກເປີດເຜີຍ (ເຊັ່ນ: ການຜູກມັດ ionic ລະຫວ່າງທາດປະສົມທີ່ເປັນດ່າງແລະກຸ່ມ silanol, ກໍາລັງ van der Waals ແລະພັນທະບັດ hydrogen ລະຫວ່າງທາດປະສົມອາຊິດແລະກຸ່ມ silanol), ດັ່ງນັ້ນການປັບປຸງປະສິດທິພາບຂອງຖັນແລະຮູບຮ່າງສູງສຸດ. . ໄລຍະການຜູກມັດທີ່ບໍ່ໄດ້ກໍານົດໄວ້ຈະຜະລິດທາງເລືອກທີ່ແຕກຕ່າງກັນທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບໄລຍະການຜູກມັດ capped, ໂດຍສະເພາະສໍາລັບຕົວຢ່າງຂົ້ວ.
- ຂອບເຂດການນໍາໃຊ້ຂອງຖັນ chromatography ຂອງແຫຼວທີ່ແຕກຕ່າງກັນ
ບົດນີ້ຈະອະທິບາຍຂອບເຂດການນໍາໃຊ້ຂອງປະເພດຕ່າງໆຂອງຖັນ chromatography ຂອງແຫຼວຜ່ານບາງກໍລະນີ.
3.1 ຖັນ chromatographic ໄລຍະປີ້ນກັບກັນ C18
ຖັນ C18 ແມ່ນຖັນໄລຍະປີ້ນກັບກັນທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປທີ່ສຸດ, ເຊິ່ງສາມາດຕອບສະຫນອງການທົດສອບເນື້ອໃນແລະຄວາມບໍ່ສະອາດຂອງສານອິນຊີສ່ວນໃຫຍ່, ແລະໃຊ້ໄດ້ກັບສານທີ່ມີຂົ້ວປານກາງ, ຂົ້ວອ່ອນແລະບໍ່ມີຂົ້ວ. ປະເພດແລະສະເພາະຂອງຖັນ chromatographic C18 ຄວນໄດ້ຮັບການຄັດເລືອກຕາມຄວາມຕ້ອງການແຍກຕ່າງຫາກສະເພາະ. ຕົວຢ່າງ, ສໍາລັບສານທີ່ມີຄວາມຕ້ອງການການແຍກສູງ, 5 μm * 4.6 mm * 250 mm ສະເພາະແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ເລື້ອຍໆ; ສຳລັບສານທີ່ມີເມຕຣິກແຍກສະລັບສັບຊ້ອນແລະມີຂົ້ວທີ່ຄ້າຍຄືກັນ, ຂໍ້ສະເພາະ 4 μm * 4.6 mm * 250 mm ຫຼືຂະຫນາດຂອງອະນຸພາກຂະຫນາດນ້ອຍກວ່າສາມາດນໍາໃຊ້. ຕົວຢ່າງ, ຜູ້ຂຽນໄດ້ໃຊ້ຖັນ 3 μm * 4.6 mm * 250 mm ເພື່ອກວດຫາສອງ impurities genotoxic ໃນ celecoxib API. ການແຍກຕ່າງຫາກຂອງສານທັງສອງສາມາດບັນລຸ 2.9, ເຊິ່ງເປັນທີ່ດີເລີດ. ນອກຈາກນັ້ນ, ພາຍໃຕ້ການຮັບປະກັນການແຍກ, ຖ້າການວິເຄາະຢ່າງໄວວາແມ່ນຕ້ອງການ, ຖັນສັ້ນຂອງ 10 ມມຫຼື 15 ມມມັກຈະຖືກເລືອກ. ຕົວຢ່າງ, ເມື່ອຜູ້ຂຽນໃຊ້ LC-MS/MS ເພື່ອກວດພົບຄວາມບໍ່ສະອາດຂອງ genotoxic ໃນ piperaquine phosphate API, ຖັນ 3 μm * 2.1 mm * 100 mm ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້. ການແຍກລະຫວ່າງຄວາມບໍ່ສະອາດແລະອົງປະກອບຕົ້ນຕໍແມ່ນ 2.0, ແລະການກວດພົບຕົວຢ່າງສາມາດສໍາເລັດໃນ 5 ນາທີ. 3.2 ຖັນ phenyl ໄລຍະປີ້ນກັບກັນ
ຖັນ Phenyl ແມ່ນປະເພດຂອງຖັນໄລຍະປີ້ນກັບກັນ. ປະເພດຂອງຄໍລໍານີ້ມີການຄັດເລືອກທີ່ເຂັ້ມແຂງສໍາລັບທາດປະສົມທີ່ມີກິ່ນຫອມ. ຖ້າການຕອບສະຫນອງຂອງທາດປະສົມທີ່ມີກິ່ນຫອມທີ່ວັດແທກໂດຍຖັນ C18 ທໍາມະດາແມ່ນອ່ອນແອ, ທ່ານສາມາດພິຈາລະນາປ່ຽນຖັນ phenyl. ຕົວຢ່າງ, ເມື່ອຂ້ອຍກໍາລັງສ້າງ celecoxib API, ການຕອບສະຫນອງອົງປະກອບຕົ້ນຕໍທີ່ວັດແທກໂດຍຖັນ phenyl ຂອງຜູ້ຜະລິດດຽວກັນແລະຂໍ້ກໍາຫນົດດຽວກັນ (ທັງຫມົດ 5 μm * 4.6 mm * 250 mm) ແມ່ນປະມານ 7 ເທົ່າຂອງຖັນ C18. 3.3 ຖັນໄລຍະປົກກະຕິ
ໃນຖານະເປັນການເສີມທີ່ມີປະສິດຕິຜົນຕໍ່ຖັນໄລຍະປີ້ນກັບກັນ, ຖັນໄລຍະປົກກະຕິແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບທາດປະສົມທີ່ມີຂົ້ວສູງ. ຖ້າຫາກວ່າຈຸດສູງສຸດແມ່ນຍັງໄວຫຼາຍໃນເວລາທີ່ eluting ກັບໄລຍະນ້ໍາຫຼາຍກ່ວາ 90% ໃນຖັນໄລຍະປີ້ນກັບກັນ, ແລະແມ້ກະທັ້ງໃກ້ຊິດກັບແລະ overlaps ກັບຈຸດສູງສຸດຂອງ solvent, ທ່ານສາມາດພິຈາລະນາການປ່ຽນຖັນໄລຍະປົກກະຕິ. ຖັນປະເພດນີ້ປະກອບມີຖັນ hilic, ຖັນ amino, ຖັນ cyano, ແລະອື່ນໆ.
3.3.1 ຖັນ Hilic ຖັນ Hilic ປົກກະຕິແລ້ວຝັງກຸ່ມ hydrophilic ໃນລະບົບຕ່ອງໂສ້ alkyl ຜູກມັດເພື່ອເສີມຂະຫຍາຍການຕອບສະຫນອງຕໍ່ສານຂົ້ວ. ປະເພດຂອງຄໍລໍານີ້ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບການວິເຄາະສານ້ໍາຕານ. ຜູ້ຂຽນໄດ້ໃຊ້ຄໍລໍາປະເພດນີ້ໃນເວລາທີ່ເຮັດເນື້ອໃນແລະສານທີ່ກ່ຽວຂ້ອງຂອງ xylose ແລະອະນຸພັນຂອງມັນ. isomers ຂອງ xylose derivative ຍັງສາມາດແຍກອອກໄດ້ດີ;
3.3.2 ຖັນ Amino ແລະຖັນ cyano ຖັນ Amino ແລະຖັນ cyano ຫມາຍເຖິງການແນະນໍາການດັດແກ້ amino ແລະ cyano ໃນຕອນທ້າຍຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ alkyl ຜູກມັດ, ຕາມລໍາດັບ, ເພື່ອປັບປຸງການຄັດເລືອກສໍາລັບສານພິເສດ: ຕົວຢ່າງ, ຖັນ amino ເປັນທາງເລືອກທີ່ດີ. ສໍາລັບການແຍກ້ໍາຕານ, ອາຊິດ amino, ຖານ, ແລະ amides; ຖັນ cyano ມີການຄັດເລືອກທີ່ດີກວ່າເມື່ອແຍກສານໂຄງສ້າງທີ່ຄ້າຍຄືກັນ hydrogenated ແລະ unhydrogenated ເນື່ອງຈາກມີພັນທະບັດ conjugated. ຖັນ Amino ແລະຖັນ cyano ມັກຈະຖືກປ່ຽນລະຫວ່າງຖັນໄລຍະປົກກະຕິ ແລະຖັນໄລຍະປີ້ນກັບກັນ, ແຕ່ການສະຫຼັບເລື້ອຍໆແມ່ນບໍ່ແນະນຳ. 3.4 ຖັນ Chiral
ຖັນ Chiral, ຕາມຊື່ແນະນໍາ, ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບການແຍກແລະການວິເຄາະຂອງສານປະກອບ chiral, ໂດຍສະເພາະໃນຂົງເຂດການຢາ. ຖັນປະເພດນີ້ສາມາດຖືກພິຈາລະນາເມື່ອໄລຍະປີ້ນກັບກັນແບບດັ້ງເດີມແລະຖັນໄລຍະປົກກະຕິບໍ່ສາມາດບັນລຸການແຍກ isomers. ຕົວຢ່າງ, ຜູ້ຂຽນໃຊ້ຖັນ chiral 5 μm * 4.6 mm * 250 mm ເພື່ອແຍກສອງ isomers ຂອງ 1,2-diphenylethylenediamine: (1S, 2S)-1, 2-diphenylethylenediamine ແລະ (1R, 2R)-1, 2. -diphenylethylenediamine, ແລະການແຍກຕ່າງຫາກລະຫວ່າງທັງສອງໄດ້ບັນລຸປະມານ 2.0. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຖັນ chiral ແມ່ນລາຄາແພງກວ່າປະເພດອື່ນໆຂອງຖັນ, ປົກກະຕິແລ້ວ 1W + / ສິ້ນ. ຖ້າຕ້ອງການຄໍລໍາດັ່ງກ່າວ, ຫນ່ວຍງານຈໍາເປັນຕ້ອງມີງົບປະມານພຽງພໍ. 3.5 ຖັນແລກປ່ຽນໄອອອນ
ຖັນແລກປ່ຽນ ion ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບການແຍກແລະການວິເຄາະຂອງ ions ຄິດຄ່າ, ເຊັ່ນ: ion, ທາດໂປຼຕີນ, ອາຊິດ nucleic, ແລະສານ້ໍາຕານບາງ. ອີງຕາມປະເພດຂອງ filler, ພວກມັນຖືກແບ່ງອອກເປັນຖັນແລກປ່ຽນ cation, ຖັນແລກປ່ຽນ anion, ແລະຖັນການແລກປ່ຽນ cation ທີ່ເຂັ້ມແຂງ.
ຖັນແລກປ່ຽນ cationic ປະກອບມີຖັນທີ່ອີງໃສ່ທາດການຊຽມແລະ hydrogen, ເຊິ່ງສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບການວິເຄາະສານ cationic ເຊັ່ນອາຊິດ amino. ຕົວຢ່າງ, ຜູ້ຂຽນໃຊ້ຄໍລໍາທີ່ມີທາດການຊຽມເມື່ອວິເຄາະທາດການຊຽມ gluconate ແລະ calcium acetate ໃນການແກ້ໄຂລ້າງ. ສານທັງສອງມີການຕອບໂຕ້ທີ່ເຂັ້ມແຂງຢູ່ທີ່ λ = 210nm, ແລະລະດັບການແຍກອອກໄດ້ເຖິງ 3.0; ຜູ້ຂຽນໄດ້ໃຊ້ຄໍລໍາທີ່ໃຊ້ hydrogen ໃນເວລາທີ່ການວິເຄາະສານທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບ glucose. ສານທີ່ກ່ຽວຂ້ອງຫຼາຍຊະນິດ - maltose, maltotriose ແລະ fructose - ມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງພາຍໃຕ້ເຄື່ອງກວດຈັບຄວາມແຕກຕ່າງ, ໂດຍມີຂອບເຂດຈໍາກັດການກວດພົບຕ່ໍາສຸດ 0.5 ppm ແລະລະດັບການແຍກຂອງ 2.0-2.5.
ຖັນການແລກປ່ຽນ Anion ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບການວິເຄາະສານ anionic ເຊັ່ນອາຊິດອິນຊີແລະ halogen ions; ຖັນການແລກປ່ຽນ cation ທີ່ເຂັ້ມແຂງມີຄວາມສາມາດແລກປ່ຽນ ion ສູງແລະການຄັດເລືອກ, ແລະເຫມາະສົມສໍາລັບການແຍກແລະການວິເຄາະຂອງຕົວຢ່າງສະລັບສັບຊ້ອນ.
ຂ້າງເທິງນີ້ແມ່ນພຽງແຕ່ການແນະນໍາກ່ຽວກັບປະເພດແລະລະດັບການນໍາໃຊ້ຂອງຄໍລໍາ chromatography ແຫຼວທົ່ວໄປຫຼາຍລວມກັບປະສົບການຂອງຜູ້ຂຽນເອງ. ມີຄໍລໍາ chromatographic ປະເພດພິເສດອື່ນໆໃນການນໍາໃຊ້ຕົວຈິງ, ເຊັ່ນ: ຖັນ chromatographic pore ຂະຫນາດໃຫຍ່, ຄໍລໍາ chromatographic pore ຂະຫນາດນ້ອຍ, ຖັນ chromatography affinity, ຖັນ multimode chromatographic, ຖັນ chromatography ແຫຼວປະສິດທິພາບສູງ (UHPLC), ຖັນ chromatography ນ້ໍາ supercritical ( SFC), ແລະອື່ນໆ.ພວກເຂົາມີບົດບາດສໍາຄັນໃນຂົງເຂດຕ່າງໆ. ປະເພດສະເພາະຂອງຖັນ chromatographic ຄວນໄດ້ຮັບການຄັດເລືອກຕາມໂຄງສ້າງແລະຄຸນສົມບັດຂອງຕົວຢ່າງ, ຄວາມຕ້ອງການແຍກແລະຈຸດປະສົງອື່ນໆ.
ເວລາປະກາດ: ມິຖຸນາ-14-2024